Molecular profile of stromal cells in primary cultures of prostate in normal and patients with prostate cancer

Abstract

Рак предстательной железы – заболевание, занимающее четвёртое место по частоте среди раковых заболеваний в популяции и второе место – среди мужского населения в мире. В настоящее время ключевыми методами диагностики рака предстательной железы являются макроскопическое исследование и определение уровня секреции ПСА, однако они обладают рядом недостатков, среди которых ложноположительные результаты и недостаточно высокий уровень точности, что не позволяет достоверно предсказывать дальнейшее течение болезни и возможность рецидива. Исходя из этого, существует необходимость в выявлении более надёжных маркеров рака ПЖ, с помощью которых можно более полно описать течение болезни и подобрать соответствующее лечение. Одним из направлений существующих исследований является поиск маркеров, характерных для стромальных клеток в очаге опухолеобразования, что связано с ключевой ролью эпителиально-мезенхимных взаимодействий в предстательной железе. Цель настоящего исследования: охарактеризовать продукцию мезенхимных, эпителиальных и регуляторных маркеров в первичных культурах стромальных клеткок, полученных из нормальной и опухолевой ткани предстательной железы человека, на ранних и поздних пассажах. В рамках данной цели были поставлены следующие задачи: 1. Получить первичные культуры стромальных клеток из нормальной и опухолевой ткани предстательной железы пациентов, подвергнутых радикальной простатэктомии по поводу рака предстательной железы. 2. Оценить на 2-7 пассажах продукцию стромальными клетками нормальной и опухолевой ткани предстательной железы мезенхимных (N-кадгерин, виментин), эпителиальных (Е-кадгерин, цитокератин 8) и регуляторных маркеров (β-катенин, Slug). 3. Провести сравнительный анализ продукции маркеров стромальными клетками нормальной и опухолевой ткани предстательной железы в ходе их культивирования. В рамках данной работы были получены и криоконсервированы четыре первичных культуры стромальных клеток нормальной и опухолевой ткани предстательной железы человека. При помощи метода иммунофлуоресцентного окрашивания клеток была охарактеризована продукция данными клетками, мезенхимных, эпителиальных и регуляторных маркеров на 2-7 пассажах.

Prostate cancer is a disease that ranks fourth in the frequency among cancers in the population and second among the male population in the world. At present, the key diagnostic methods for prostate cancer are macroscopic examination and determination of the level of PSA secretion, but they have a number of disadvantages including false positive results and insufficient accuracy, which does not allow to predict the course of the disease and the possibility of relapse precisely. Consequently, there is a need to identify more reliable markers of prostate cancer. This information could be used to improve diagnostics and prognostics of the disease. One of the areas of existing research is the search for markers that indicate changes in stromal cells in the site of tumour growth, which is associated with key role of epithelial-mesenchymal interactions in the prostate. The aim of this study is to characterize the production of the mesenchymal, epithelial and regulatory markers in primary cultures of stromal cells derived from normal and tumor tissue of the human prostate gland in early and late passages. Within the framework of this goal the following tasks were set: 1. To obtain primary cultures of stromal cells from normal and tumor tissue of the prostate of patients undergoing radical prostatectomy for prostate cancer. 2. To estimate the production of the mesenchymal (N-cadherin, vimentin), epithelial (E-cadherin, CK8) and regulatory markers (β-catenin, Slug) in stromal cells derived from normal and tumor tissue at 2-7 passages. 3. To conduct a comparative analysis of the production of these markers in the stromal cells derived from normal and tumor tissue of the prostate in the course of their culturing. In this work, four primary cultures of stromal cells derived from normal and tumor tissue of the human prostate gland were established and cryopreserved. By the method of immunofluorescence the production of the mesenchymal, epithelial and regulatory markers in stromal cells derived from normal and tumor tissue at 2-7 passages was characterized.