Immunohistochemical characteristics of neurogenesis in fetal brain

Abstract

В настоящее время практически не изучен профиль экспрессии маркеров пролиферирующих, созревающих и уже дифференцированных нервных клеток в ткани мозга плода, хотя это представляет собой значительный интерес, поскольку, во-первых, существенно дополняет представления о нейрогенезе, протекающем в физиологических условиях, а, во-вторых, дает возможность более точно соотносить между собой процессы, происходящие при физиологическом нейрогенезе и при разнообразных поражениях нервной ткани. Целью работы было изучение процессов нейрогенеза в мозге плода с помощью метода иммуногистохимии. Материалом для исследования служила ткань мозга (большие полушария) двух мертворожденных плодов 23-24 недель гестации. Полученная ткань мозга была окрашена гематоксилином и эозином, а также на отдельных срезах была проведена иммуногистохимическая реакция на белки NeuN, Ki-67, PCNA, Nestin и Musashi1. Под световым микроскопом в каждом микропрепарате было исследовано по 5 полей зрения в коре, белом веществе и герминативном матриксе. Было выявлено, что по мере уменьшения числа низкодифференцированных клеток и, соответственно, по мере уменьшения количества клеток, находящихся в активных фазах клеточного цикла, по направлению от герминативного матрикса к коре наблюдается снижение уровня экспрессии маркеров делящихся (Ki-67, PCNA) и плюрипотентных (SOX2, Nestin) клеток и повышение уровня экспрессии маркеров зрелых нейронов (NeuN).

The goal of the work was to explore the processes of neurogenesis in fetal brain by dint of immunohistochemistry. A brain tissue (large hemispheres) of 2 stillborn fetuses (23-24 weeks of gestation) was the material for investigation. The brain tissue was stained by hematoxylin and eosin, and in addition the immunohistochemical reaction was done to proteins NeuN, Ki-67, PCNA, Nestin and Musashi1. 5 fields of view in cortex, white matter and germinative matrix were examined under the light microscope. We have found out that the less cells are in active phases of the cell cycle (in direction from the herminative matrix to the cortex) the less is the level of expression of dividing (Ki-67, PCNA) and pluripotent (SOX2, Nestin) cell markers. At the same time the level of the mature neuron marker (NeuN) was rising from the herminative matrix to the cortex.