Генетическое изучение автономных и интегрированных плазмид, несущих ген ADE2 Saccharomyces cerevisiae

Abstract

Mitotic stability of replicating plasmid YEp ade2-ll wich contains LEU2 and ADE2 genes of S. cerevisiae is less than 10%. Stability of plasmid increased after cultivation transformants (strain 90—D201) under selective conditions. Transformants which contain integrating plasmid YEp ade2-ll are more stable (about 100%). We studied sites of integration of the two-marker (ADE2, LEU2) plasmid basing upon destabilization of chromosomes bearing 2u DNA. More often plasmid YEp ade2-ll integrated into the chromosome XV, where ADE2 located, but sometimes it integrated into the chromosome III, where LEU2 located.

Автономно реплицирующаяся эписомная плазмида YEpade 2—11, содержащая дрожжевые гены ADE2 и LEU2, обладает митотической стабильностью менее 10 %. В процессе культивирования трансформантов штамма 90-Д201 плазмидой YEpade2—11 ее стабильность может спонтанно увеличиваться. Наибольшей стабильностью обладают трансформанты, содержащие плазмиду в интегрированном состоянии. Для идентификации хромосом клетки-хозяина, содержащих плазмиду, использован эффект «стабилизации хромосом после интеграции эписомных плазмид. Плазмида YEpade 2—11 имеет области гомологии с XV (локус ade2) и III (локус 1еа2) хромосомами. Наиболее часто интеграция плазмиды происходит в XV хромосому, по-видимому, из-за большей протяженности области гомологии с XV хромосомой, чем с III. Интеграция в другие хромосомы клетки-хозяина не обнаружена.