Study of interaction of TRPC channels with ORAI proteins in HEK293 cell line

Abstract

Кальций — универсальный внутриклеточный посредник. Депо-управляемые кальциевые каналы активируются в ответ на опустошение кальциевого депо — эндоплазматического ретикулума. Вход кальция через депо-управляемые каналы — важный путь поступления Ca2+ в цитоплазму. Нарушение работы депо-управляемых каналов приводит к различным патологическим состояниям. На настоящий момент известно две группы депо-управляемых каналов: каналы ORAI и каналы TRPC. Работы последних лет показали, что активация каналов TRPC и ORAI взаимосвязана. Однако, до сих остается не до конца понятно, как именно происходит это взаимодействие. Регистрируя активность одиночных депо-управляемых каналов на клетках линии HEK293 мы показали, что белки ORAI не входят в пору эндогенных каналов Imax (включающих в свой состав белки TRPC1), причем активация каналов ORAI необходима для чувствительности каналов Imax к опустошению депо. Наши данные позволяют предположить, что каналы TRPC в ответ на опустошение депо кальция активируются вслед за каналами ORAI.

Calcium — is ubiquitous intracellular messenger. Store-operated calcium channels activate in response to depletion of calcium store — endoplasmic reticulum. Calcium entry through store operated channels is a significant pathway of calcium concentration rise in cytoplasm. Recent publications proved, that activations of ORAI and TRPC channels are coupled. However, the mechanisms underlying these interactions still remain unclear. We studied single channel activity of store operated calcium channels in HEK293 cell line. We have proved, that ORAI proteins doesn’t serve as a pore forming subunit in endogenous TRPC1 Imax channels, moreover ORAI channels activity is necessary to maintain sensivity of Imax channels to calcium store. Our data allow us to consider, that TRPC channels activates in response to depletion of calcium stores downstream to ORAI channels.