РЕЦЕНЗИЯ на выпускную квалификационную работу бакалавра Симаревой Анастасии Дмитриевны по теме «Изучение взаимосвязи активного деметилирования и фрагментации ДНК в клетках сперматогенного ряда при нарушениях сперматогенеза у человека»  Генетические и эпигенетические аспекты мужского гаметогенеза активно изучаются во всем мире, в том числе с использованием ВРТ. Большое внимание уделяется роли различных факторов окружающей среды, особенно обладающих повреждающим воздействием, и выявлению механизмов их влияния на гаметогенез. В связи с этим выпускная квалификационная работа Анастасии Дмитриевны Симаревой, посвященная оценке фрагментации и активного деметилирования ДНК на различных этапах сперматогенеза у пациентов с нарушением фертильности, имеет большую актуальность.  Целью данной работы является анализ взаимосвязи процессов образования 5-гидроксиметилцитозина и фрагментации ДНК в клетках сперматогенного ряда человека при нарушениях фертильности. Название выпускной квалификационной работы соответствует ее содержанию. Цели и задачи работы сформулированы четко и ясно. Работа представлена на 50 страницах печатного текста и содержит традиционные разделы: «Введение», «Обзор литературы», «Материал и методы», «Результаты и обсуждение», «Заключение», «Выводы» и «Список литературы». Последний включает 98 источника, все на английском языке. Список сокращений облегчает прочтение работы. Обзор литературы занимает 17 страниц. В нем достаточно подробно рассмотрены этапы сперматогенеза человека, нарушения сперматогенеза, детально описаны процессы репрограммирования генома в ходе метилирования и деметилирования ДНК, в том числе при мужском гаметогенезе, а также влияние различных факторов окружающей среды на эпигенетические изменения в ДНК человека. Раздел включает 3 иллюстрации. Приведенные ссылки показывают хорошее знакомство автора с современным состоянием исследований в данной области.  Раздел «Материал и методы» представлен на 5 страницах. Хочется отметить, что использованные методы исследования достаточно сложны технически, требуют большой аккуратности и безусловно являются большим плюсом работы. Замечание к этому разделу – недостаточно полное описание выборки (какие именно нарушения фертильности были у включенных пациентов, каков были их возраст), а также некоторых пунктов протокола (какие антитела к 5-гидроксиметилцитозину были использованы и пр.). Пожелание автору на будущее – стараться избегать лабораторного жаргона в описании использованных методов. Раздел «Результаты и обсуждение» содержит 11 страниц, где достаточно детально изложены полученные экспериментальные данные. Использованные таблицы, диаграммы и микрофотографии хорошо продуманы и способствуют лучшему пониманию полученных результатов. Проведенный статистический анализ соответствует задачам исследования.  У рецензента возникли вопросы к этому разделу: 1. На стр. 33 при анализе содержания 5-гидроксиметилцитозина и фрагментированной ДНК в гаплоидных ядрах клеток биоптата семенников теоретически ожидаемое число клеток, содержащих оба этих маркера, сравнивалось с фактически обнаруженным. У всех пациентов, кроме одного, эти показатели статистически не различались. Чем отличался этот пациент от всех остальных – возраст, диагноз, анамнез? 2.  Автор описывает «тенденцию в сторону положительной связи» между долей сперматозоидов, содержащих одновременно 5-гидроксиметилцитозин и фрагментированную ДНК, и долей неподвижных сперматозоидов в эякуляте. Может ли автор предположить механизм такой связи? 3.  Почему в качестве контроля не был использован эякулят здоровых (фертильных) мужчин? Было бы интересно посмотреть содержание 5-гидроксиметилцитозина и/или фрагментированной ДНК у них и сравнить с тем, что автор выявил у мужчин с нарушением фертильности. Возможно, такой сравнительный анализ будет проведен в ходе последующей работы.  Результаты данного исследования показывают, что у фрагментации ДНК и 5-гидроксиметилцитозина имеется общий триггер – активные формы кислорода; более того, полученные данные показывают, на каком этапе сперматогенеза их воздействие становится наиболее значимым. Представленные результаты получены впервые и имеют как фундаментальное, так и прикладное значение и могут служить основой для дальнейших исследований и разработки новых методов лечения мужского бесплодия.  Автор формулирует 2 вывода, полностью соответствующих поставленным задачам и полученным результатам Общее замечание к представленному тексту – большое количество технических опечаток. Однако это не умаляет остальных достоинств работы Симаревой Анастасии Дмитриевны, которая по уровню исполнения и изложения соответствует всем требованиям, предъявляемым к выпускным квалификационным работам бакалавров, и без сомнения заслуживает оценки «отлично».  Начальник лаборатории генетики клиники ≪АВА-ПЕТЕР≫ PhD,  к.б.н. Е.М.Федорова