РЕЦЕНЗИЯ на выпускную квалификационную работу обучающегося в СПбГУ Грехнёва Дмитрия Александровича по теме: «Депо-управляемый вход кальция во взрослых кардиомиоцитах мыши» В последние годы появилось множество статей, посвященных центральной роли кальция в запуске сокращения клеток сердечной мышцы, в его участии в сигнальных процессах в кардиомиоцитах. В связи с этим, работы по изучению нарушения депо-управляемого притока кальция внутрь кардиомиоцитов являются несомненно очень актуальными и наукозначимыми. Особенно в связи с данными, что нарушения функционирования депо-управляемых каналов обнаруживается при развитии ряда заболеваний. Выпускная квалификационная работа (ВКР) бакалавра Дмитрия Александровича Грехнёва посвящена изучению роли депо-управляемого входа ионов кальция в кардиомиоцитах взрослых мышей дикого типа и мышей модельной линии с миодистрофией Дюшенна (mdx). Тема ВКР несомненно актуальна. Цели и задачи исследования сформулированы четко и логично вытекают из «Введения», где автор проанализировал данные самых последних лет и показал связь транспорта кальция в клетке миокарда с возможными причинами ряда сердечных заболеваний. Содержание ВКР безусловно соответствует заявленной в названии работы теме. Задачи, поставленные для решения цели исследования, были решены, и выводы не вызывают сомнения. Тема, заявленная в названии работы , полностью раскрыта. ВКР (36 стр.) построена по традиционному плану и включает такие разделы как: Содержание, Введение, Цели и задачи исследований , Список сокращений, Обзор литературы, Материалы и методы, Результаты и обсуждение, Заключение , Выводы и Список цитируемой литературы. Обзор литературы отражает данные новейших исследований , 35 проанализированных работ из 84 вышли за последние 5 лет. Обзор написан очень хорошим языком, логично и показывает глубокое проникновение и заинтересованность Д.А. Грехнёва темой исследования. Что ценно: в обзоре приведены схемы поддержания кальцевого гомеостаза и особенности участия кальция в процессах передачи сигнала в кардиомиоитах , составленные по данным литературы самим автором ВКР. Работа Д.А. Грехнёва во многом носит методический характер, что характерно для начала выполнения новой темы студентом. В методической части работы использованы приборы и методики, которые стали применяться в биологии в последние годы. Прежде всего, автором проведена огромная подготовительная работа по получению навыков выделения первичной культуры кардиомиоцитов желудочков сердца мыши, по подбору оптимальных условий. Это безусловно работа, требующая аккуратности, тщательности и определенных навыков, с чем Дмитрий Александрович успешно справился. Процедура выделения первичной культуры описана очень подробно, с приложением ряда советов и предостережений, что очень ценно для дальнейшего воспроизводства этих приемов другими исследователями. Кроме того, Д. А. Грехнёв освоил и подробно описал приемы и процедуру электрофоретического анализа лизатов кардиомиоцитов. Об этом свидетельствуют приведенные в работе данные электрофореза и иммуноблотинга. К сожаленью, не удалось получить четких результатов, так как в некоторых лизатах содержалось недостаточное количество белков STIM1/2 и TRPC , и они не прокрасились. В связи с этим хотелось бы уточнить , какие условия получения лизатов были использованы в работе, можно ли получать их более концентрированными? В работе также не указаны условия проведения электрофореза, его тип и т.п. Эти исследования будут продолжены, я думаю, при обучении в магистратуре, и автору необходимо будет уточнить все детали для получения нужных результатов. На данный момент результаты электрофоретических исследований не выявили разницы в экспрессии каналообразующих белков депо-управляемого входа кальция ( Orail 1 и Orail 3) у мышей дикого типа и mdx. Главным достоинством данной ВКР являются, конечно, электрофизиологические исследования автора. Впервые были зарегистрированы депо-управляемые токи кальция в зрелых кардиомиоцитах у мышей дикого типа. В литературе есть данные по депо-управляемым токам кальция в кардиомиоцитах, но только в случае неонатальных кардиомиоцитов. Пока не удалось показать этот эффект на зрелых кардиомиоцитах мышей линии с миодистрофией Дюшенна. Вопрос остается открытым . Полученные результаты подробно обсуждены в разделе « Результаты и обсуждение». Этот раздел работы хорошо иллюстрирован 7-ю рисунками. ВКР очень аккуратно оформлена, но , как и все первые работы студентов, все-таки имеет ряд оформительских огрехов. В списке цитируемой литературы (84источников, из них все на англ. языке; 35 работ за последние 5 лет), встречаются сноски , представленные в работе, но отсутствующие в списке или присутствующие в списке, но не обнаруженные в тексте. В тексте работы встречаются не выправленные опечатки. Однако эти незначительные погрешности не влияют на общее положительное впечатление от работы в целом. Выпускная квалификационная работа Грехнёва Дмитрия Александровича по научной значимости полученных результатов и их интерпретации, по объему проведенных исследований и оформлению несомненно соответствует требованиям, предъявляемым к выпускным квалификационным работам бакалавров и заслуживает оценки «ОТЛИЧНО», а ее автор - присуждения звания « Бакалавр» Доцент кафедры биохимии биологического факультета , канд. биол. наук, доцент И.Е. Красовская 30.05.2018